皮內(nèi)反應(yīng)
1、前言
最終的醫(yī)療器械中可能存在各種各樣的化學(xué)成分,例如各種添加劑,包括滑、染色劑、粘合劑以及滅菌過程中產(chǎn)生的滅菌劑殘留物等,應(yīng)考慮這些成分是否具有潛在的刺激活性。刺激的特征會(huì)表現(xiàn)為發(fā)炎、發(fā)紅、腫脹、發(fā)熱和疼痛。因此,刺激性測(cè)試對(duì)于評(píng)估醫(yī)療器械暴露于人體后立即引起刺激性反應(yīng)的潛力至關(guān)重要。
刺激性測(cè)試包括皮內(nèi)反應(yīng)、皮膚刺激、眼刺激、黏膜刺激測(cè)試,當(dāng)器械不適用于該設(shè)備的使用(眼睛、皮膚或黏膜)時(shí),像植入類器械和外部接入器械,則需要選擇皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn),皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn)是一種體內(nèi)試驗(yàn),通過對(duì)皮內(nèi)注射醫(yī)療器械的浸提液來評(píng)估引起刺激的可能性。
2、依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)
2.1 ISO 10993-23 Biological evaluation of medical devices – Part 23: Tests for irritation;
2.2 GB/T16886.10 醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià) – 第10部分:刺激和皮膚致敏試驗(yàn)。
3、試驗(yàn)系統(tǒng)
新西蘭兔3只。
4、試驗(yàn)樣品制備
依據(jù)GB/T 16886.12制備極性和非極性浸提液。
5、試驗(yàn)步驟
5.1 適應(yīng)環(huán)境7日后的健康成年新西蘭兔,試驗(yàn)前4h,將3只兔子脊柱兩側(cè)用自動(dòng)剃毛刀各剪去10cm×15cm的兔毛,剪毛過程中不造成兔子皮膚損傷。選擇皮膚沒有損傷且完好的兔子用于試驗(yàn)。
5.2 在每只兔子脊柱左、右側(cè)等距離分為上下各5個(gè)注射點(diǎn),左上側(cè)5個(gè)點(diǎn)注射極性浸提液,左下側(cè)5個(gè)點(diǎn)注射非極性浸提液,右上側(cè)5個(gè)點(diǎn)注射極性對(duì)照液,右下側(cè)5個(gè)點(diǎn)注射非極性對(duì)照液,其余兔子用同樣方法進(jìn)行注射,每個(gè)注射點(diǎn)注射量為0.2 mL。如圖1所示。
圖1 皮內(nèi)注射點(diǎn)位置 | 1.頭端 2.0.2 mL 極性浸提液注射點(diǎn) 3.0.2 mL 非極性浸提液注射點(diǎn) 4.0.2 mL 極性對(duì)照液注射點(diǎn) 5.0.2 mL 非極性對(duì)照液注射點(diǎn) 6.尾端 |
注射完畢,即刻、24 h、48 h和72 h觀察和記錄各個(gè)注射部位的皮膚反應(yīng)情況,按表1對(duì)每一觀察時(shí)期各個(gè)注射點(diǎn)紅斑和紅腫進(jìn)行評(píng)分,并記錄試驗(yàn)結(jié)果。
6、結(jié)果評(píng)價(jià)
在72h評(píng)分后,分別將每只動(dòng)物試驗(yàn)樣品或空白對(duì)照的24h、48h、72h的全部紅斑與水腫記分相加,再除以15(3個(gè)觀察時(shí)期×5個(gè)注射部位),計(jì)算出每只動(dòng)物試驗(yàn)樣品或空白對(duì)照的記分。3只動(dòng)物記分相加后除以3得出每一試驗(yàn)樣品和相應(yīng)空白對(duì)照的總平均記分。試驗(yàn)樣品記分減去空白對(duì)照記分可得出試驗(yàn)樣品最終記分。如試驗(yàn)樣品最終記分不大于1.0,則符合試驗(yàn)要求。在任何觀察期,如試驗(yàn)樣品平均反應(yīng)疑似大于空白對(duì)照反應(yīng),應(yīng)另取3只家兔復(fù)試,如試驗(yàn)樣品最終記分不大于1.0,則符合試驗(yàn)要求。(注:空白對(duì)照樣為極性或非極性溶劑對(duì)照。)
表1. 皮內(nèi)反應(yīng)記分系統(tǒng)
反應(yīng) | 記分 |
紅斑和焦痂形成 | |
無紅斑 | 0 |
極輕微紅斑(勉強(qiáng)可見) | 1 |
清晰紅斑 | 2 |
中度紅斑 | 3 |
重度紅斑(紫紅色)至無法進(jìn)行分級(jí)的焦痂形成 | 4 |
水腫形成 | |
無水腫 | 0 |
極輕微水腫(勉強(qiáng)可見) | 1 |
清晰水腫(腫起邊緣清晰) | 2 |
中度水腫(腫起約1 mm) | 3 |
重度水腫(腫起超過1 mm并超出接觸區(qū)) | 4 |
刺激最高記分 | 8 |
注:應(yīng)記錄并報(bào)告注射部位的其他異常情況 |